Neonatal diarrhea and rotavirus A infection in beef and dairy calves, Brazil, 2006-2015 / Diarreia neonatal e infecção por rotavírus A em bezerros de corte e leite, Brasil, 2006-2015

Calf diarrhea causes substantial economic losses in the cattle industry worldwide. Bovine rotavirus A (RVA) is the main viral agent that leads to enteric infection and diarrhea outbreaks in calves throughout the world. The aim of this retrospective (2006-2015) study was to determine the frequency of RVA detection in diarrheic fecal samples from beef and dairy calves from the three main cattle-producing regions of Brazil. Diarrheic fecal samples (n=1,498) of 124 beef and 56 dairy cattle herds from the Midwest, South, and Southeast geographical regions of Brazil were evaluated using the silver-stained polyacrylamide gel electrophoresis (ss-PAGE) technique. RVA double stranded-RNA was identified by the ss-PAGE technique in 410 (27.4%) fecal samples. The frequency of positive samples found in beef calves (31.9%; 328/1,027) was higher than the frequency found in diarrheic fecal samples from dairy calves (17.4%; 82/471). RVA infection was identified in calves from the three Brazilian geographical regions analyzed. However, the frequency of positive diarrheic calves in the Midwest region (39.4%), predominantly beef calves, was higher than in the South (19.4%) and Southeast (17.6%) regions. The temporal distribution of RVA-infected calves evaluated by two five-year periods (2006-2010, 24.5%; 2011-2015, 28.8%) demonstrated a very similar frequency of RVA in both periods. Considering the wide regional and temporal scope of this study, it can be concluded that RVA remains an important etiology of neonatal diarrhea in calves of Brazilian cattle herds.(AU)

A diarreia neonatal ocasiona perdas econômicas importantes na pecuária bovina em todo o mundo. Rotavírus A (RVA) é o principal agente etiológico viral de infecções entéricas e surtos de diarreia em bezerros de rebanhos de corte e leite. O objetivo deste estudo retrospectivo (2006-2015) foi determinar a frequência de detecção de RVA em amostras de fezes diarreicas de bezerros de corte e leite das três principais regiões produtoras de bovinos do Brasil. Amostras de fezes diarreicas (n=1.498) de 124 rebanhos bovinos de corte e 56 rebanhos bovinos de leite das regiões Centro-Oeste, Sul e Sudeste do Brasil foram avaliadas utilizando a técnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (EGPA). O genoma segmentado de RVA foi identificado pela técnica de EGPA em 410 (27,4%) amostras de fezes. A frequência de amostras positivas encontrada em bezerros de rebanhos de corte (31,9%; 328/1.027) foi maior que a frequência identificada em amostras de fezes diarreicas de bezerros de rebanhos leiteiros (17,4%; 82/471). A infecção por RVA foi identificada em bezerros das três regiões geográficas brasileiras analisadas. No entanto, a frequência de bezerros com diarreia positivos para RVA na região Centro-Oeste (39,4%), predominantemente de bezerros de rebanhos de corte, foi maior que nas regiões Sul (19,4%) e Sudeste (17,6%). A distribuição temporal dos bezerros infectados com RVA avaliados por dois períodos de cinco anos (2006-2010, 24,5%; 2011-2015, 28,8%) demonstrou uma frequência muito semelhante em ambos os períodos. Considerando a amplitude regional e temporal deste estudo, pode-se concluir que RVA continua sendo uma importante etiologia de diarreia neonatal em bezerros de rebanhos bovinos brasileiros.(AU)

Outbreak of neonatal diarrhea caused by multiple genotypes of rotavirus A in a beef calves herd / Surto de diarreia neonatal por múltiplos genótipos de rotavírus A em um rebanho de bovinos de corte

Calf diarrhea causes substantial economic losses to beef cattle production worldwide. It is a complex multifactorial pathological condition influenced by infectious, nutritional and environmental factors. The present study focused on analyzing the pathological and molecular characterization of bovine rotavirus A (BoRVA) during a diarrhea outbreak in a beef cattle herd located in the state of Mato Grosso, central-western region, Brazil. The outbreak caused high morbidity (80%) and mortality (12%) among 1,100 calves up to 30 days of age. The BoRVA was identified in 53.3% (16/30) of the diarrheic fecal samples analyzed using the silver-stained polyacrylamide gel electrophoresis (ss-PAGE) technique. The nucleotide sequence analysis of VP7 (G genotype) and VP4 (P genotype) via RT-PCR from eight BoRVA-positive fecal samples showed the genotypes G6P[5] (n = 6), G6P[11] (n = 1) and G6P[X] (n = 1). Three calves were necropsied and the gross findings included edema and thickened, wrinkled bowel mucosa in the small intestine. Microscopic lesions were confined to the villi of the small intestine, characterized mainly by villus fusion and moderate multifocal lymphoplasmacytic enteritis. Immunohistochemical examination of three cases was positive for BoRVA. The 53.3% of the diarrheic fecal samples that were positive for BoRVA in this study suggested that RV was the etiological agent involved in this neonatal calf diarrhea outbreak.(AU)

A diarreia neonatal provoca perdas econômicas substanciais na produção de bovinos em todo o mundo. É uma condição patológica multifatorial complexa influenciada por fatores infecciosos, nutricionais e ambientais. O presente estudo teve por objetivo caracterizar o rotavírus tipo A (BoRVA) através da análise patológica e molecular durante um surto de diarreia em um rebanho bovino localizado no estado de Mato Grosso, região centro-oeste, no Brasil. O surto causou alta morbidade (80%) e letalidade (12%) em um rebanho composto 1.100 bezerros até 30 dias de idade. O BoRVA foi identificado em 53,3% (16/30) das amostras fecais diarreicas analisadas usando a técnica de eletroforese em gel de poliacrilamida corada com prata (ss-PAGE). A análise da sequência nucleotídica de VP7 (genótipo G) e VP4 (genótipo P) via RT-PCR a partir de oito amostras fecais BoRVA-positivas mostrou os genótipos G6P [5] (n = 6), G6P [11] (n = 1) e G6P [X] (n = 1). Três bezerros foram submetidos à necropsia e os achados macroscópicos incluíram edema e espessamento da mucosa do intestino delgado. As lesões microscópicas foram observadas nas vilosidades do intestino delgado, sendo caracterizadas principalmente por fusiosamento de vilosidades e enterite linfoplasmocitária multifocal moderada. O exame imunohistoquímico dos três casos foram positivos para o BoRVA. As 53,3% das amostras fecais diarreicas positivas para o BoRVA sugeriram que o rotavírus é o agente etiológico envolvido neste surto de diarreia neonatal em bezerros.(AU)

Group A rotavirus gastroenteritis: post-vaccine era, genotypes and zoonotic transmission / Gastroenterite por rotavírus do grupo A: era pós-vacinal, genótipos e transmissão zoonótica

ABSTRACT This article provides a review of immunity, diagnosis, and clinical aspects of rotavirus disease. It also informs about the changes in epidemiology of diarrheal disease and genetic diversity of circulating group A rotavirus strains following the introduction of vaccines. Group A rotavirus is the major pathogen causing gastroenteritis in animals. Its segmented RNA genome can lead to the emergence of new or unusual strains in human populations via interspecies transmission and/or reassortment events.

RESUMO Este artigo fornece uma revisão sobre imunidade, diagnóstico e aspectos clínicos da doença causada por rotavírus. Também aponta as principais mudanças no perfil epidemiológico da doença diarreica e na diversidade genética das cepas circulantes de rotavírus do grupo A, após a introdução vacinal. O rotavírus do grupo A é o principal patógeno associado à gastroenterite em animais. Seu genoma RNA segmentado pode levar ao surgimento de cepas novas ou incomuns na população humana, por meio de transmissão entre espécies e eventos de rearranjo.

Monitoring and molecular characterization of group Drotavirus in brazilian poultry farms / Monitoramento e caracterização molecular de rotavírus do grupo D em criações comerciais brasileiras

Rotaviruses are etiological agents of diarrhea both in humans and in several animal species. Data on avian Group D rotaviruses (RVD) are scarce, especially in Brazil. We detected RVD in 4 pools of intestinal contents of broilers, layer and broiler breeders out of a total of 111 pools from 8 Brazilian states, representing an occurrence of 3.6%, by a specific RVD RT-PCR targeting the VP6 gene. Phylogenetic tree confirmed that the Brazilian strains belong to group D and 3 of the sequences were identical in terms of amino acid whereas one showed 99.5% identity with the others. The sequences described in this study are similar to other sequences previously detected in Brazil, confirming the conserved nature of the VP6 protein.

Rotavírus são agentes etiológicos de diarreia tanto em humanos como em várias espécies animais. Dados sobre rotavírus do grupo D (RVD) em aves são escassos, especialmente no Brasil. Nós detectamos RVD em 4 pools de conteúdo intestinal de frango de corte, poedeiras e matrizes de um total de 111 pools originários de 8 estados brasileiros, representando uma ocorrência de 3,6% a partir de uma RT-PCR específica para RVD, tendo como alvo o gene VP6. A árvore filogenética confirmou que as amostras brasileiras pertencem ao grupo D e três das sequências obtidas foram idênticas em termos de aminoácidos enquanto uma apresentou 99,5% de identidade com as demais. As sequências aqui definidas são semelhantes a outras sequências previamente definidas no Brasil, confirmando a natureza conservada da proteína VP6.

Detecção de rotavírus do grupo A em amostras fecais: adaptação do teste de aglutinação em látex para o emprego de anticorpos IgY anti-Rotavírus A / Detection of group a rotavirus in fecal samples: adaptation of latex agglutination test for anti-rotavirus a igy antibody employment

A infecção pelo rotavírus A (RVA) é responsável por cerca de 453.000 mortes anualmente e aproximadamente 40 por cento das hospitalizações por diarreia em crianças menores de cinco anos em todo o mundo, sendo o principal causador de gastroenterite aguda nesse grupo populacional. O desenvolvimento de um método de diagnóstico rápido, barato, sensível e específico para a detecção de RVA é importante do ponto de vista epidemiológico porque permite identificar surtos no local de ocorrência. O uso da imunoglobulina Y (IgY), anticorpo purificado a partir da gema de ovo, vem crescendo nos últimos anos, devido às características vantajosas quando comparada com a imunoglobulina G (IgG), como a obtenção de anticorpos de forma não invasiva e a produção de anticorpos em grandes concentrações. Este trabalho objetivou a adaptação de um teste de diagnóstico através da substituição do anticorpo de captura IgG pela IgY específica para o antígeno de RVA (LATEXY-ROTA). Para isto 09 frangas poedeiras foram imunizadas com o RVA, os ovos foram coletados e a IgY purificada a partir da gema do ovo por polietileno glicol 6.000, seguida da purificação adicional por cromatografia de troca iônicaA IgY anti-RVA purificada foi ligada covalentemente à partículas de poliestireno e usada como insumo na adaptação de um teste de aglutinação em látex, sendo testada em um painel de amostras fecais sabidamente positivas e negativas previamente selecionadas pelo Centro Regional de Referência para Rotaviroses do Laboratório de Virologia Comparada e Ambiental (LVCA/IOC-FIOCRUZ)...

Foi obtida uma sensibilidade de 75 por cento e uma especificidade de 87,5 por cento quando o LATEXY-ROTA foi comparado com um teste imunoenzimático comercial disponível (padrão ouro). Quando comparado com dois testes comerciais de aglutinação em látex testados no painel de amostras utilizando a IgG, o LATEXY-ROTA obteve uma sensibilidade de 100 por cento e especificidade de 88,24 por cento. Baseado nos dados obtidos, sugerimos a viabilidade da substituição da IgG por IgY no ensaio de aglutinação pelo látex...

The infection by rotavirus (RV) is responsible for approximately 453,000 deaths annually and approximately 40 percent of hospitalizations by diarrhea in children under five years worldwide, being the major cause of acute gastroenteritis in this populationgroup. The development of a rapid method, inexpensive, sensitive and specific for rotavirus diagnosis is important from the disease because it allows the identification of outbreaks in the site of occurrence. The use of Immunoglobulin Y (IgY) antibodypurified from egg yolk, has been grown in recent years, due to the advantageous features compared to immunoglobulin G (IgG), as a noninvasive recovery of antibodies and production in high concentrations. The aim of this method was to adapt a diagnostic test by replacing the IgG capture antibody by specific IgY for RVAantigen (LATEXY-ROTA). For that, 09 laying hens were immunized with RVA, the eggs were collected and IgY purified from egg yolk by polyethylene glycol 6,000, followed by purification by ion exchange chromatography. The purified anti-IgY RVA was covalently bound to polystyrene particles, being tested in a panel of positive and negative fecal samples previously determined by the Rotavirus Regional ReferenceCenter of Comparative and Environmental Virology Laboratory (LVCA/IOCFIOCRUZ). A sensitivity of 75% and specificity of 85,7% was observed when the adapted test was compared to a commercial available enzyme immunoassay (goldenstandard). When compared to two commercial latex agglutination tests using the IgG tested on the panel of samples, the LATEXY-ROTA had a sensitivity of 100 percent and specificity of 88.2 percent. Based on the obtained data, we suggest the feasibility of replacing the IgG by IgY in the latex agglutination assay...

A surveillance of enteropathogens in piglets from birth to seven days of age in Brazil / Levantamento dos enteropatógenos de leitões do nascimento a sete dias de idade no Brasil

The purpose of the study was to evaluate the real importance of anaerobic enteropathogens and rotavirus in contrast to more common agents as cause of diarrhea in piglets within the first week of life. Sixty 1- to 7-day-old piglets, 30 diarrheic and 30 non-diarrheic (control), from 15 different herds were selected, euthanized and necropsied. Samples of the jejunum, ileum, colon, cecum and feces were collected from the piglets and analyzed to determine the presence of the following enteropathogens: enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC), Clostridium perfringens types A and C, Clostridium difficile, rotavirus and Isospora suis. Among diarrheic piglets, 23.3% were positive for C. difficile, 70% for C. perfringens type A cpb2+, 14.3% for rotavirus and 10% for ETEC. Among non-diarrheic control piglets, 10% were positive for C. difficile, 76.7% for C. perfringens type A cpb2+, 0% for rotavirus, 3.3% for ETEC and 3.3% for I. suis. C. perfringens type C was not detected in any of the animals. Histological lesions characteristic of C. difficile, E. coli and rotavirus were observed. However, no C. perfringens type A suggestive lesions were detected. There was a positive correlation between mesocolon edema and the presence of C. difficile toxins. Although C. perfringens type A cpb2+ was the most frequently detected enteropathogen, there was no association between its presence and diarrhea or macro or microscopic changes. C. difficile and Rotavirus were the most relevant pathogens involved with neonatal diarrhea in this study, and histopathology associated with microbiological test proved to be the key to reach a final diagnosis.

O objetivo do presente estudo foi avaliar a real importância de enteropatógenos anaeróbios e rotavirus em comparação à outros agentes mais comuns como causa de diarreia em leitões até cinco dias de idade. Leitões com 0 a 7 dias de vida, 30 diarreicos e 30 não diarreicos (controles) de 15 granjas diferentes foram eutanasiados e necropsiados. Amostras de jejuno, íleo, colon e ceco foram coletadas e submetidas à detecção dos seguintes enteropatógenos: Escherichia coli enterotoxigênica (ETEC), Clostridium perfringens, Clostridium difficile, rotavirus e Isospora suis. Entre os animais diarréicos, 23.3% foram positivos para C. difficile, 70% para C. perfringens tipo A cpb2+, 14.3% para rotavirus e 10% para ETEC. Entre os leitões não-diarréicos, 10% foram positivos para C. difficile, 76.7% para C. perfringens tipo A cpb2+, 3.3% para ETEC e 3.3% for I. suis. C. perfringens tipo C não foi detectado em nenhum animal. Lesões histológicas características de C. difficile, E. coli e rotavirus foram observadas. Por outro lado, nenhuma lesão sugestiva de C. perfringens foi detectada. Foi possível observar uma correlação positiva entre edema de mesocolon e presença das toxinas A/B. Apesar de C. perfringens tipo A cpb2+ ter sido o patógeno mais encontrado, nenhuma associação com lesões foi encontrada. C. difficile e Rotavirus foram os agentes mais relevantes associados à diarreia neonatal, e ficou demonstrada a relevância de associação de histopatologia com testes de detecção microbiológica para se firmar um diagnóstico.

Rotavírus em alimentos: revisão de literatura / Rotavirus in food: a review

O rotavírus é um agente etiológico de doenças alimentares, cuja contaminação é de natureza infecciosa transmitida através de consumo de alimentos ou água. O presente estudo reúne informações sobre este agente etiológico, a melhor forma de prevenir a contaminação dos alimentos pelo rotavírus, a fim de evitar a propagação de agentes etiológicos veiculados por alimentos. O patógeno afeta animais, homens adultos e principalmente crianças com menos de cinco anos de idade, podendo levar ao óbito. Tem distribuição mundial e apresenta uma significativa morbidade e mortalidade em países subdesenvolvidos e em desenvolvimento. Ocorre com mais freqüência em períodos secos nas regiões temperadas, e durante todo o período do ano em regiões tropicais. Tem grande potencial infectante e é eliminado em grande quantidade nas fezes sendo a transmissão fecal-oral. Não são eliminados da água pelos métodos convencionais de tratamento. Os indivíduos com infecção assintomática representam um obstáculo ao controle endêmico, sendo a doença autolimitante. O afastamento da função do indivíduo infectado torna-se obrigatório evitando-se propagação. Devem ser seguidas as orientações e normas para manipuladores, além da vacinação em crianças pequenas.

Infecciones virales intestinales en pediatría / Intestinal viral infections in pediatrics

Los virus que causan diarrea en humanos generalmente muestran gran trofismo por las células epiteliales del intestino delgado. El mecanismo tradicionalmente aceptado es que estos agentes causan enfermedad destruyendo gran cantidad de entericitos maduros, (sea por lisis directa o induciendo la apoptosis) los que son reemplazados por células inmaduras provenientes de las criptas. Esto lleva a una absorción inadecuada de agua, electrolitos y nutrientes, con capacidad conservada de secretar cloro y agua. A diferencia de lo que ocurre frente a patógenos bacterianos invasores, la respuesta inflamatoria del huésped es leve y no contribuye significativamente en el mecanismo de la diarrea viral. Estudios posteriores han llevado a postular mecanismos adicionales, que no serían autoexcluyentes. Se ha descrito que algunas proteínas virales no estructurales actuarían como enterotoxina. Además, jugaría un rol la alteración de las uniones estrechas con aumento del flujo paracelular de agua y electrolitos, el aumento de la secreción intestinal mediada por neurotransmisores, y la microisquemia vellositaria. El impacto de la enteritis viral es mayor y la recuperación más lenta en niños previamente desnutridos. Se ha demostrado en animales de experimentación desnutridos un notorio retraso en la recuperación de la capacidad enzimática y absortiva de la mucosa intestinal frente a una enteritis viral, lo que refuerza la necesidad de una temprana y efectiva rehabilitación nutricional durante los episodios agudos de diarrea. Es ampliamente conocido que la lactancia materna, disminuye la incidencia y severidad de las diarreas virales en niños, los primeros meses de vida.

Viruses that cause diarrhea in humans generally show great tropism due to epithelial cells of the small intestine. The traditionally accepted mechanism is that these agents cause illness by destroying large number of mature enterocytes (via direct lysis or by inducing apoptosis), which are replaced by immature cells coming from the crypts. This leads to an inadequate absorption of water, electrolytes and nutritients with conserved chloride and water secretion. In contrast to invasive bacterial pathogens, the host infl amatory response is mild and it does not contribute significantly to the mechanism of viral diarrhea. Subsequent studies have leaded to postulate additional mechanisms that would not exclude each other. It has been described that some non-structural viral proteins may act as enterotoxin. In addition, the alteration of the tight junctions with an enhanced paracellular flow of water and electrolytes, the increase of neurotransmitter mediated intestinal secretion, and the micro-ischemia of villi would also play a role. The impact of viral enteritis is larger and the recovery slower in previously undernourished children. Studies carried out on undernourished experimentation animals have demonstrated a notorious delay in the recovery of the enzymaticand absorptive capacity of intestinal mucosa after viral enteritis, which reinforces the need for early and effective nutritional rehabilitation during episodes of acute diarrhea. It is well-known that the breastfeeding reduces the incidence and severity of viral diarrheas in children during the first months of life.

Enteritis virales en adultos inmunocompetentes, agentes clásicos y emergentes / Viral enteritis in immunocompetent adults: classic and emergent agents

Objetivo: Revisar aspectos epidemiológicos y clínicos de las enteritis de etiología viral en pacientes adultos inmunocompetentes. Resumen: La diarrea aguda infecciosa (enteritis) es una patología relevante en todo el mundo y aún es responsable de una alta mortalidad en niños y elevada morbilidad en adultos. En pacientes adultos inmunocompetentes la etiología viral es frecuentemente subestimada aunque la mayoría de las enteritis agudas son causadas por virus. Los agentes virales más frecuentemente identificados son el Norovirus, Rotavirus, Astrovirus, y Adenovirus. Su principal vía de contagio es la ruta fecal-oral y el cuadro clínico suele ser en su gran mayoría leve y autolimitado, con manifestaciones clínicas similares e inespecíficas: diarrea acuosa, náuseas, vómitos y dolor abdominal. Adultos mayores y pacientes inmunosuprimidos pueden presentar cuadros más severos y prolongados. El tratamiento es fundamentalmente sintomático. La prevención se basa en tomar medidas sanitarias y limitar el contagio de persona a persona. Virus respiratorios emergentes como SARS e InfluenzaA-H1N1, con frecuencia comprometen el tracto gastrointestinal y en períodos de epidemia deben ser considerados en el diagnóstico diferencial de enteritis aguda.

Objective: To review epidemiological and clinical aspects of viral enteritis in immunocompetent adult patients. Abstract: Acute infectious diarrhea (enteritis) is a worldwide important disease and it still accounts for high mortality among children and high morbidity among adults. In immunocompetent adult patients the viral etiology is frequently underestimated, although the most common cause of acute enteritis is avirus. The mos frequently identified viral agents are Norovirus, Rotavirus, Astrovirus, and Adenovirus. The main mechanism of spread of the disease is fecal-oral transmission and the clinical setting is commonly mild and self-limited, with clinical manifestations that are similar and unspecific: aqueous diarrhea, nausea, vomiting and abdominal pain. Elderly and immunosupressed patients may show more severe and prolonged episodes. Treatment is mainly symptomatic. Prevention is based on taking sanitary measures and reducing person-to-person transmission. Emerging respiratory viruses as SARS and A-H1N1 influenza frequently compromise the gastrointestinal tract and during epidemic periods these viruses should be considered in differential diagnosis of acute enteritis.

[Vaccine potential of rotavirus outer capsid protein [VP4] cloned into the plasmid]

Rotaviruses are associated with endemic diarrhea in children under the age of 5, leading to approximately 800,000 deaths every year. Introduction of rotavirus vaccines into childhood immunization programs can contribute to substantial reduction in mortality from rotavirus gastroenteritis in developing countries. VP4 is outer capsid spike protein of rotavirus by which virus can bind to its receptor. VP4 protein can induce production of neutralizing antibodies. Regarding these concepts we cloned VP4 gene of rotavirus in plasmid vector for future expression. BSC-1 cells were cultured as a monolayer. Rotavirus CPE positive cell cultures were freeze-thawed three times. Rotavirus was partially purified by ultracentrifuge. Oligonucleotide primers, specific for gene segment 4 which encodes VP4, were synthesized. Rotavirus RNA extracted and used as a template for synthesis of cDNA by reverse transcriptase. Then they proliferated by PCR and PCR products were cloned into plasmid vector which was analyzed by restriction enzymes and sequencing. Sequencing result was analyzed with BLAST software that had a 100% homology with SA11 rotavirus genome segment 4 in NCBI Gene Bank. Sequencing result confirms highly that the nucleotide sequences of VP4 gene after long and continuous passage of SA11 rotavirus is conserved in our laboratory

Generalidades en diarrea aguda: [revisión] / General aspects in acute diarrhea: [review]

Existen dos avances en el manejo de la diarrea, que podrían reducir el número de muertes infantiles; el primero la formulación de Sales de Rehidratación Oral con menor concentración de glucosa y sodio; el segundo la suplementación con zinc para disminuir la duración, severidad y episodios futuros. La OMS/OPS define la diarrea aguda como la eliminación de tres o más evacuaciones intestinales líquidas o semilíquidas en 24 horas. El enterocito, como unidad funcional del intestino, posee una serie de transportadores donde ocurre el proceso de movilización de glucosa y de iones, para mantener el equilibrio eléctrico adecuado. En la evaluación del paciente la anamnesis se realiza con el fin de precisar la severidad de la diarrea y su posible causa. En el examen físico se tendrá en cuenta que esta enfermedad puede ser un signo o síntoma que se relaciona con trastornos extraintestinales. El examen de heces puede ser una herramienta útil en la investigación etiológica. Puede cuantificarse el gradiente osmótico (GAP fecal) y determinar si estamos en presencia de una diarrea osmótica o secretora. La presencia de 5 o más leucocitos fecales sugiere un proceso invasivo siendo de utilidad la realización de un recuento diferencial, si los polimorfonucleares se encuentran en 64% o más, puede ser posible recuperar bacterias en el coprocultivo. Este último tendrá indicación en algunos grupos que por edad o patología se consideran de riesgo elevados por ser no inmuno competentes. La serología para rotavirus permitiría el aislamiento rápido de pacientes infectados para limitar un brote.

Two recent advances in the management of diarrhea which could reduce child deaths are the formulation of Oral Rehydration Salts with a lower concentration of glucose and sodium, and zinc supplementation to decrease the duration and severity of future episodes. Acute diarrhea is defined by the WHO as the passage of three or more loose stools in 24 hours. The enterocyte, as the functional unit of the intestine, has a number of carriers which contribute to the mobilization process of glucose and ions to maintain the proper electrical balance. In the evaluation of the patient, the medical history will clarify the severity of diarrhea and its possible cause. During the physical examination, the fact that this disease may be a sign or symptom associated with extra intestinal disorders should be taken into account. Feces analysis may be a diagnostic tool. Osmotic gradient can be quantified (fecal GAP) to distinguish osmotic from secretory diarrhea. The presence of 5 or more fecal leukocytes suggests an invasive process and if PMNs are found in 64% or more in the differential cell count, it maybe possible to recover bacteria in a stool culture. The latter is indicated in some children considered of high risk for their low immune competence due to their age or to certain pathologies. Serology for rotavirus allows the rapid isolation of infected patients in order to limit an outbreak.

Diversidade genotípica de rotavírus suínos no Estado de São Paulo / Diversity of porcine rotavirus genotypes in São Paulo State, Brazil

Rotavírus é uma das causas mais comuns de diarréia tanto em humanos quanto em diferentes espécies animais. Foi conduzido um estudo transversal a partir de 144 amostras fecais diarréicas colhidas de leitões, provenientes de 16 criações comerciais distribuídas por 10 municípios do Estado de São Paulo, Brasil, com o objetivo de se detectar a ocorrência de rotavírus e realizar sua caracterização molecular quanto seus genotipos G e P. Um total de 43 amostras (29,86 por cento) foram positivas para rotavírus por Eletroforese em Gel de Poliacrilamida (PAGE) e ELISA, num esquema de triagem em paralelo. A caracterização mediante reações do tipo nested-multiplex RT-PCR demonstrou que, isoladamente, o genotipo P[6] foi o mais frequente, detectado em 25,58 por cento das amostras, seguido pelo P[1] (11,63 por cento) e P[7] (9,3 por cento). Infecções concomitantes de genotipos P[6]+P[7] (9,3 por cento), P[1]+P[6] (4,65 por cento), P[1]+P[6]+P[7] (2,33 por cento) foram também observadas. Analogamente, o genotipo G[5] foi detectado em 30,23 por cento das amostras, seguido pelo G[10] (20,93 por cento) e G[6] (4,65 por cento) e G[5]+G[10] (18,6 por cento). O genotipo G[5]P[6] foi o mais frequente (11,63 por cento), porém outras combinações e amostras não tipificáveis também foram observadas. Considerando-se a diversidade de rotavírus suínos encontrada na população estudada, medidas profiláticas específicas devem levar em conta, para sua efetividade, o grau de proteção cruzada entre os genotipos presentes nas formulações vacinais e aqueles que realmente são circulantes numa região.

Rotavirus is one the most common causes of diarrhea both in humans and different animal species. It was carried out a transversal study with 144 diarrheic fecal samples of piglets, from 16 commercial swine-producing units distributed among 10 municipalities of São Paulo State, Brazil, aiming at the detection of rotavirus occurrence and its molecular characterization according to G and P genotypes. A total of 43 samples (29.86 percent) were positive for rotavirus by Polyacrylamide Gel Electrophoresis (PAGE) and ELISA, in a parallel screening scheme. The nested-multiplex RT-PCR characterization revealed that, separately, the P[6] genotype was the most frequent, detected in 25.58 percent of the samples, followed by P[1] (11.63 percent) and P[7] (9.3 percent). Concomitant infection of the genotypes P[6]+P[7] (9.3 percent), P[1]+P[6] (4.65 percent), P[1]+P[6]+P[7] (2.33 percent) were also found. Similarly, the G[5] genotype was detected on 30.23 percent of the samples, followed by G[10] (20.93 percent), G[6] (4.65 percent) and G[5]+G[10] (18.6 percent). The genotype G[5]P[6] was the most frequent (11.63 percent), but other combinations and untypeable samples were also observed. Considering the diversity porcine rotavirus found in the surveyed population, specific prophylactic measures should take in charge, for its effectiveness, the cross-protection degree between the genotypes present on vaccine formulations and those that really circulates on a region.

Excreção e transmissão do vírus da diarréia viral bovina por bezerros persistentemente infectados / Shedding and transmission of bovine viral diarrhea virus by persistently infected calves

Bezerros persistentemente infectados (PI) nascidos de vacas infectadas com amostras não-citopáticas do vírus da diarréia viral bovina (BVDV) se constituem nos principais reservatórios do vírus na natureza. Este trabalho relata uma investigação do padrão de excreção e transmissão viral por cinco bezerros PI produzidos experimentalmente pela inoculação de vacas prenhes com isolados brasileiros do BVDV. Cinco bezerros que sobreviveram a infecção intrauterina nasceram saudáveis, soronegativos e com a presença de vírus no sangue. Após o desmame - e desaparecimento dos anticorpos colostrais - os bezerros PI foram monitorados semanalmente durante 150 dias para a presença de vírus e títulos virais no soro e em secreções (ocular, oral, nasal e genital). Os títulos virais no soro de cada animal apresentaram pequenas variações durante o período (com exceção de um animal que apresentou um aumento de título tardiamente), mas os títulos variaram amplamente entre os animais (entre 10² e 10(6)TCID50/ml). O vírus também foi excretado continuamente nas secreções de todos os animais, com pequenas variações de título entre as coletas. Os maiores títulos virais foram geralmente detectados nas secreções nasais e oculares (títulos de 10(4) a 10(6)TCID50/mL), enquanto as secreções orais e genitais usualmente continham títulos virais baixos (10² a 10³TCID50/mL). Com o objetivo de avaliar a dinâmica de transmissão viral, um bezerro PI foi introduzido em um grupo de 10 bezerros soronegativos, mantido com uma alta densidade animal e submetido a manejo diário para simular as condições de manejo semi-intensivo. Após 30 dias de convívio com o bezerro PI, todos os demais animais haviam soroconvertido ao BVDV. Para investigar a transmissão viral sob condições extensivas, outro bezerro PI foi incorporado a um rebanho de 48 animais mantido a campo, com baixa densidade animal e submetido a manejo extensivo. Dentre estes animais, 8/48 (16,6 por cento) foram soropositivos ...

Persistently infected (PI) calves born to cows infected with non-cytopathic bovine virus diarrhea virus (BVDV) represent the main reservoir of the virus in nature. We herein report an investigation on the patterns of virus shedding and transmission by five PI calves produced experimentally through inoculation of pregnant cows with Brazilian BVDV isolates. Five calves that survived intrauterine infection were born healthy, lacking neutralizing antibodies to BVDV and harboring virus in the blood. After weaning - and following the disappearance of colostral antibodies - PI calves were monitored for virus in serum and body secretions (ocular, oral, nasal and genital) at weekly intervals for up to 150 days. For each animal, the virus titers in serum showed minor variations throughout the collections (with one exception that presented an increase late in infection), yet the titers varied widely among animals (from 10² to 10(6)TCID50/mL). Virus shedding in secretions was detected steadily during all the observation period with minor titer variations for each particular animal. The highest titers were generally detected in nasal and ocular secretions (titers 10(4) to 10(6)TCID50mL) whereas genital and oral secretions usually contained low amount of virus (10² to 10³TCID50mL). To evaluate the kinetics of virus transmission by these animals, one PI was introduced on a group of 10 seronegative calves maintained with a high animal density simulating the conditions of an intensive management. All 10 contact calves seroconverted to BVDV by day 30. Another PI calf was introduced into a 48-head herd kept under a low animal density, extensive grass management. Among these animals, 8/48 (16.6 percent) seroconverted by day 10, 26/48 (54.1 percent) by day 40 and 37/48 (77 percent) were seropositive at day 100, when the monitoring was discontinued. These results show that continuous viremia and virus shedding in high titers in secretions by PI animals assure ...

Estudio epidemiológico y clínico de las diarreas por rotavirus en niños menores de 5 años atendidos en centros asistenciales del estado Miranda-Venezuela / Epidemiological and clinical study of diarrhea by rotavirus in children 5 years of age attended in medical centers of the Miranda State Venezuela

Con el objeto de conocer la epidemiología y clínica de la infección por rotavirus (RV) tratada de forma ambulatoria, se realizó un estudio en 5 centros (un hospital tipo I y 4 ambulatorios) del estado Miranda, entre febrero 2006 y enero 2007. Se evaluaron 194 niños menores de 5 años con diarrea aguda y se analizaron las siguientes variables: género, edad, estrato socioeconómico, alimentación, estado nutricional, clínica, diagnóstico de RV por Ensayo Inmuno Enzimático (ELISA) y su tipificación G por RT-PCR. La población presentó las siguientes características: 53 por ciento de varones, 17,6 ± 14,05 meses de edad (media), 68 por ciento de clase obrera y marginal (Graffar 4 y 5), 59 por ciento de lactancia materna en el primer año de vida, 13 por ciento de desnutrición, 40 por ciento de deshidratación y 19 por ciento de infección por RV. Los episodios RV positivos se asociaron significativamente a vómitos (94 por ciento, P < 0,0001) y a desnutrición (30 por ciento, P = 0,0010) al compararlos con los RV negativos. En los casos deshidratados fue mayor significativamente la desnutrición (21 por ciento, P = 0,00232) y la presencia de RV (28 por ciento, P = 0,0407). Encontramos entre la población del hospital y los ambulatorios diferencias respecto al graffar 4 y 5 (90 por ciento vs 53 por ciento, P < 0,0001), desnutrición (23 por ciento vs 6 por ciento, P = 0,006), deshidratación (63 por ciento vs 24 por ciento, P<0,0001) y RV (27 por ciento vs 13 por ciento, P = 0,027). Se tipificaron 14 cepas RV positivos resultando el 29 por ciento de tipo G1, 21 por ciento de G3 y 14 por ciento de G4. Este estudio sugiere que los RV, en la región estudiada, son causa de diarreas severas asociadas a desnutrición, pobreza y afectan significativamente a la población mayor de un año.

Detección molecular de Escherichia coli productor de shiga toxina (Stx1) y rotavirus en heces de niños con diarrea / Molecular detection of shiga toxin-producing (stx1) Escherichia coli and rotavirus in stoolos of children with diarrhea

Se investigó la presencia de E. coli productora de shiga toxina y rotavirus en heces de 90 niños diarreicos con edades comprendidas entre 0 y 3 años. De cada muestra se tomaron tres alícuotas: una se sometió a enriquecimiento previo para E. coli O157, con otra se hizo siembra directa en placas con agar MacConkey-Sorbitol y Rojo Eosina con MUG y la ultima se congeló a –70°C para el análisis posterior de rotavirus. La búsqueda de E. coli O157 se realizó por inmunocromatografía in vitro de Coris Bioconcept (Bélgica) y O157:H7 por serología con antisueros FUVESIN. La presencia del antígeno O157 (rbfO157) y de los genes que codifican para las shiga toxinas (stx1 y stx2) se determinó por PCR. Los rotavirus se detectaron por electroforesis en geles de poliacrilamida. Las 90 muestras de heces analizadas resultaron negativas para el antígeno O157 y para O157:H7. La PCR corroboró que 9 cepas sospechosas aisladas de los medios de cultivos, eran cepas STEC no O157 y portadoras del gen stx1, mostrando un 10% de positividad. La electroforesis para el ARN viral detectó rotavirus en 21 (23,33%) muestras. Se confirma el predominio de rotavirus y se sugiere que la circulación de cepas STEC no 0157, es un indicio de la participación de estas cepas en la etiología de las diarreas agudas.

Vigilancia de diarreas en menores de 5 años / Surveillance of diarrhea in children under 5 years old

En nuestro país la vigilancia de las diarreas en los menores de 5 años se realiza a través de la modalidad de Centros Centinela. Durante el año 2002 se inició la implementación de la vigilancia de morbilidad, que da cuenta de la magnitud del problema (tasas de incidencia por edad y sexo) y, en el año 2004, se continuó con la implementación de la vigilancia etiológica en un grupo de centros, partiendo con la detección de rotavirus, a fin de conocer la magnitud de este agente en las diarreas ambulatorias. Este tipo de vigilancia permite contar con información de la población para realizar los cálculos de las tasas de incidencia. Los grupos incluidos en la vigilancia son los menores de ambos sexos, de 1 año y de 1 a 4 años. Los Centros Centinela que participan son 32, principalmente consultorios de atención primaria de salud, que concentran un grupo importante de población infantil, que durante el 2004 alcanzó a un total de 104.945 niños. Durante el año 2004 se notificó un total de 8.727 cuadros de diarrea en menores de 5 años, cifra inferior al año anterior (10.891 casos). La tasa fue de un 8 por 100 niños, que proyectada a nivel nacional alcanzó un total estimado de 117.444 casos de diarrea.

Agentes etiológicos de diarrea en niños atendidos en la Unidad de Capacitacíon para el Tratamiento de la Diarrea del Hospital Universitario San Vicente de Paúl de Medellín / Diarrhea etiological agents in children seen at the Hospital Universitario San Vicente de Paúl’s Unidad de Capacitación para el Tratamiento de la Diarrea, Medellín

Objetivo: estudiar la presencia de agentes potencialmente productores de diarrea y las características de los niños atendidos en la Unidad de Capacitación para el Tratamiento de la Diarrea, del Hospital Universitario San Vicente de Paúl, de Medellín, entre 1997 y 1999. Materiales y métodos: estudio descriptivo retrospectivo. Entre los 1984 niños atendidos se realizaron los siguientes exámenes de materias fecales: coprológicos 851, coprocultivos: 564, Latex para rotavirus:150, Tinción para Criptosporidium: 142, Tinción para Campylobacter: 137. Se buscó asociación estadística entre las características personales y clínicas que presentaban los niños y los agentes identificados. Resultados: entre los niños analizados se encontró Rotavirus en 48 por ciento, Salmonella spp 11.5 por ciento, Shigella spp 3.5 por ciento, E. Coli enteropatógeno 4.2 por ciento, Criptosporidium spp 15.5 por ciento y Campylobacter spp 5.8 por ciento. Se encontró asociación estadísticamente significativa entre rotavirus y la edad de 6 a 11 meses, OR=2.99(1.45, 6.21), diarrea aguda, OR=2.93 (0.91, 9.95) y ausencia de sangre en las heces, OR=5.10 (1.51, 18.96). Entre la presencia de sangre y Salmonella spp., OR=2.82 (1.60, 4.96) y Shigella spp. OR=4.88 (1.81, 13.38) y entre E. Coli enteropatógeno y deshidratación, OR=4.67 (1.30, 19.89). Conclusiones: principales agentes identificados: Rotavirus y Salmonella spp. Los parásitos son poco frecuentes

Prevalence of rotavirus gastroenteritis at a University Teaching Hospital in Oman: a four-year study

The study was undertaken to determine the prevalence of rotavirus infection in children with gastroenteritis, and to correlate this prevalence with demographic and climatic conditions that might influence virus transmission. Stool samples from 991 children with gastroenteritis who were seen at sultan Qaboos University Hospital between Janaury 1996 and December 1999 were tested for rotavirus antigen by a latex agglutination test. Data on patients' age and gender, and the unit within the hospital where the patient was treated, were recorded Monthly temperature and relative humidity data were obtained from reports of the Department of Meteorology of the Directorate of Civil Aviation. Rotavirus antigen was detected in 114 [11.5%] of the children with diarrhea. Ninety percent of rotavirus gastroenteritis cases were under 2 years of age but neonatal rotavirus was not encountered and the youngest patient was 3 months of age. The prevalence of rotavirus infection was significantly higher in hospitalised than non-hospitalised children [12.6% v/s 7.0%, p<0.05] Infection was also more common in males than females [12.5% v/s 10.0%] but this difference was not statistically significant [p<0.25%]. More infections occurred during the cooler months of December, January and February than in the hotter months but there was no correlation with relative humidity. Rotavirus is a significant cause of gastroenteritis in young children seen at Sultan Qaboos University Hospital. Environmental temperature has some influene on virus transmission but not relative humidity